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間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)如何培養(yǎng)與鑒定?

更新時(shí)間:2020-10-30 點(diǎn)擊次數(shù):2730

相比于胚胎干細(xì)胞或神經(jīng)干細(xì)胞,MSC具有易獲取、易體外培養(yǎng)、傳代穩(wěn)定性、低免疫原性等優(yōu)勢(shì),在體外經(jīng)過(guò)多次傳代后仍具有多向分化和自我復(fù)制的潛能,且MSCs多來(lái)自于成年的組織,研究過(guò)程的道德和倫理學(xué)問(wèn)題較小。

MSC的大小與形狀具有異質(zhì)性,即不同種屬或不同組織的MSC具有不同的生長(zhǎng)形態(tài),例如三極形、長(zhǎng)梭形、小圓形、短梭形和扁平形態(tài)。幾乎所有的MSC都是貼壁生長(zhǎng),具有較強(qiáng)的貼壁能力,而MSC的原代分離也正是利用了MSC強(qiáng)貼壁的特性。例如,骨髓MSC的分離方法為:將從組織中分離出來(lái)的單個(gè)核細(xì)胞懸浮培養(yǎng)于含有FBS的培養(yǎng)基中,1~2天后去除非貼壁細(xì)胞,保留貼壁細(xì)胞再培養(yǎng)2-3周即可獲得。此外也可采用免疫磁珠對(duì)MSC進(jìn)行分選,但這種方法成本較高。

對(duì)于MSC的鑒定,常采用的方式包括形態(tài)學(xué)鑒定,表面標(biāo)志物鑒定和多系分化潛能鑒定。MSC一般呈纖維細(xì)胞樣生長(zhǎng),細(xì)胞在支持物表面呈梭形或不規(guī)則三角形生長(zhǎng),細(xì)胞中央有卵圓形核,胞質(zhì)向外伸出2-3厘米長(zhǎng)短不同的突起。MSC的細(xì)胞表面標(biāo)志物則常采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行鑒定,不同組織來(lái)源的MSCs可共享相同的細(xì)胞表面標(biāo)記,如CD29和CD44。但目前我們對(duì)MSC表面分子標(biāo)志物的研究還不完善,已發(fā)現(xiàn)的表面標(biāo)志物也存在特異性不強(qiáng)的問(wèn)題,為了讓我們更好地分離、培養(yǎng)和鑒定MSC,需進(jìn)一步不斷發(fā)現(xiàn)新的特異性標(biāo)志物。

 

 

                                         常見(jiàn)的方法 

 

茜素紅染色(成骨誘導(dǎo))

茜素紅S(AlizarinRedS)鈣染色法是一種旨在通過(guò)鰲和技術(shù),使鈣離子和茜素紅S產(chǎn)生復(fù)合物,來(lái)分析固定處理的細(xì)胞樣本中橘紅色鈣沉積現(xiàn)象的經(jīng)典的技術(shù)方法。主要適用于動(dòng)物原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測(cè)。廣泛用于骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。

 

Oil Red O(油紅O)染色成脂誘導(dǎo)

作為脂肪細(xì)胞的染色劑的原理是使用Oil Red O 的油溶性,對(duì)其它的細(xì)胞結(jié)構(gòu)著色性差。成脂肪誘導(dǎo)的過(guò)程中,細(xì)胞在胞漿中不斷有油滴的累積,并不斷的增加變大,后整個(gè)細(xì)胞的胞漿中都是油滴。Oil Red O染色的方法是對(duì)油滴的染色的一種方法。

 

成軟骨誘導(dǎo)(試劑盒)

 

 

 

                                                     好 物 推 薦   

 

品牌

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Lifeline

LL-0050

成脂培養(yǎng)基套裝

Lifeline

LL-0051

阿爾辛藍(lán)色染色試劑盒

Lifeline

LL-0052

油紅O染色試劑盒

Lifeline

LL-0059

成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基套裝

StemCell

05465

MesenCult™成骨分化套件(人類)

StemCell

05412

MesenCult™成脂分化試劑盒(人類)

StemCell

05455

MesenCult™-ACF軟骨分化試劑盒

 

 

品牌  貨號(hào)             產(chǎn)品信息
HY STEMCELLHX0201MCCGmHuMTM人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基,成分確定、無(wú)血清、無(wú)異源物
Corning88-600-CVMSC xeno-free SFM
LifelineLL-0062骨髓MSC*培養(yǎng)基套裝
LifelineLL-0034人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基套裝
LifelineLL-0073NSC+纖連
蛋白 細(xì)胞培養(yǎng)基套裝
Lifeline LL-0070NSC 培養(yǎng)基套裝
LifelineLL-0062骨髓MSC*培養(yǎng)基套裝
LifelineLL-0034人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基套裝
StemCell05445StemCell MesenCultTM 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基,成分確定、無(wú)異源
StemCell05448StemCell MesenCultTM 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基,成分確定、無(wú)異源
BI 05-200-1AMSC無(wú)血清培養(yǎng)基

 

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