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胰酶貼壁細(xì)胞的消化

更新時間:2016-06-23 點(diǎn)擊次數(shù):1505
     胰酶是自豬胰中提取的多種酶的混合物,主要為胰蛋白酶、胰淀粉酶與胰脂肪酶。按干燥品計算,每1g中含胰蛋白酶不得少于1800活力單位,胰淀粉酶不得少于21000活力單位,胰脂肪酶不得少于12000活力單位。必要時可用蔗糖或低倍胰酶稀釋。
    胰酶是胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的混合物。在中性或弱堿性條件下活性較強(qiáng),胰蛋白酶能使蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為蛋白胨,胰淀粉酶能使淀粉轉(zhuǎn)化為糖,胰脂肪酶則能使脂肪分解為甘油及脂肪酸,從而促進(jìn)消化、增進(jìn)食欲。主要用于消化不良,食欲不振及肝、胰腺疾病引起的消化障礙,同時也適用于先天性胰功能不全、腹部手術(shù)和外傷胰腺切除導(dǎo)致的胰功能不全?;蛭唇?jīng)手術(shù)切除后天引起的胰功能不全及酒精中毒引起的慢性胰腺炎等。
    胰酶使用注意:
    1、在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
    2、胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時間不宜過長,否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差。
   

胰酶貼壁細(xì)胞的消化:

    1、吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清
    2、加入少量胰酶細(xì)胞消化液,略蓋過細(xì)胞即可,根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘(不同的細(xì)胞消化時間有所不同)
    3、顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。
    4、此時吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。

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