无码系列久久久人妻无码系列,亚洲一区中文字幕不卡,欧美日本一区二区三区精品免费,欧洲国产伦久久久久久久

服務(wù)熱線

15021010459
新聞中心
當(dāng)前位置:主頁 > 新聞中心 > 細(xì)胞凍存液凍存與復(fù)蘇時的注意事項

細(xì)胞凍存液凍存與復(fù)蘇時的注意事項

更新時間:2017-03-08 點擊次數(shù):1995
     細(xì)胞凍存液是利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細(xì)胞。
    在不加任何條件下直接凍存細(xì)胞時,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細(xì)胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑,可使冰點降低。在緩慢的凍結(jié)條件下,能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞。貯存在-130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。
    細(xì)胞凍存液凍存與復(fù)蘇時的注意事項:
    1.  取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。
    2.  凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO)對細(xì)胞不是*無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作 較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液*融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。
    3.  離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。
    4.  離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除 DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大, 死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液 體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無有異常。
    5.  細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。
    6.  復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。
    7.  加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響 細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是 10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。

2025 版權(quán)所有 © 重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司  備案號:渝ICP備14000349號-4 sitemap.xml 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

地址:重慶市江北區(qū)金渝大道153號8棟20-14 傳真:023-63419626 郵件:sales@ys-bio.com

重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司主要經(jīng)營干細(xì)胞研究 干細(xì)胞治療產(chǎn)品 生物試劑 實驗耗材 藥物研發(fā)等產(chǎn)品。

關(guān)注我們

服務(wù)熱線

400-021-2200

掃一掃,關(guān)注我們

久久免费观看归女高潮特黄-黄色av一本二本在线观看| 99热在线精品免费6-av一区二区在线观看| 一区二区三区日本韩国欧美-日本1区2区3区4区在线观看| 国产成人精品免费视频大全办公室-亚洲欧美日本综合在线| 五月婷婷六月在线观看视频-亚洲黑寡妇黄色一级片| 亚洲av综合av一区东京热-黄页免费视频网站在线观看| 看肥婆女人黄色儿逼视频-秋霞电影一区二区三区四区| 欧美精品一区二区三区爽爽爽-日韩国产精品亚洲经典| 日韩亚洲欧美综合在线-成人在线网站在线观看| 日本高清二区视频久二区-大香蕉在线视频大香蕉在线视频| 国产精品美女在线网址-久草免费福利在线观看视频| 亚洲区欧美区在线视频-亚洲碰碰人人AV熟女天堂| 日韩av电影一区二区网址-老熟妇仑乱视频一区二| 亚洲黄片三级三级三级-国产成人一区二区在线视频| 一级特黄大片亚洲高清-国产精品视频伊人久久| 国产精品v欧美精品v日韩精品-国产欧美日韩精品区一区二污污污| 俄罗斯胖老太太黄色特级片-国产精品黑丝美腿美臀| 欧美视频在线观看国产专区-亚洲91精品在线观看| 十九禁止观看无码视频-亚洲国产激情福利专区| 美女把腿张开给帅哥桶-无码无套少妇18p在线直播| 久久网址一区二区精品视频-日产国产欧美视频一区精品| 99在线免费观看视频-丰满人妻一区二区三区视频53| 国产欧美日韩精品一区在线-久久精品视频免费获取地址| 人妻互换精品一区二区-夜夜爽一区二区三区视频| 在线成色中文综合网站-国产二区精品视频在线观看| 少妇一区二区三区粉嫩av-国产精品区久久久久久久| 国产欧美日本一区二区-一区二区三区亚洲在线播放| 青木玲高清中文字幕在线看-视频在线免费观看你懂的| 中文字幕日本在线资源-国产+成+人+亚洲欧洲自线| 国产精品成人欧美激情-黄色床上完整版高清无遮挡| 久久精品亚洲无中文东京热-日本妹子内谢视频一区| 午夜福利1区2区3区-午夜洗澡免费视频网站| 国产在线观看高清精品-四季av一区二区三区中文字幕| 极品人妻av在线播放-久久精品视频一区二区三区| 国产精品熟女视频一区二区-国产日韩精品欧美一区喷水| 精品国产综合一区二区三区-蜜臀一区二区三区刺激视频| 欧美伦乱淫老妇女激情吧-亚洲女邻居精品二区久久| 俄罗斯胖老太太黄色特级片-国产精品黑丝美腿美臀| 精品老熟妇一区二区三区-日韩丰满一区二区三区| 乱入一二三免费在线观看-久久精品亚洲精品国产色婷婷| 亚洲精品在线观看一二三区-在线观看国产中文字幕视频|